家兔人工授精有如下优点:一是能充分利用优良种公兔,迅速推广良种;二是减少了种公兔的饲养数量,降低了生产成本;三是避免公、母兔之间直接接触性疾病的传播;四是在杂交和配套系生产中公,母兔体型差异过大时,便于开展集约化工厂化生产管理。
家兔人工授精技术是产业化家兔生产企业建立现代化养殖体系的技术基础之,配合全进全出的42天繁育模式或49天繁育模式,可以使家兔养殖生产实现工厂化。人工授精技术需要一定的硬件和技术人员的培养,需要熟练的操作人员。
(-)人工授精实验室的建立
家兔人工授精实验室主要包括下列硬件,空调、显微镜(加温载物台)、水溶锅、恒温箱、精液贮运箱(保持17℃)、采精器具、输精器具、器皿和药剂。
(二)采精前的准备工作
1.器材的清洗与消毒 采精用的所有人工授精器材,均应力求清洁无菌。在使用之前要严格消毒,每次使用后必须洗刷干净。传统的洗涤剂是2%-3%碳酸氢钠或1%-1.5%碳酸钠溶液。器材用洗涤剂刷过后,务必立即用水多次冲洗干净而不留残迹,然后经过严格消毒方可使用。消毒方法因各种器材质地不同而异。
玻璃器材采用电热风干燥箱进行高温干燥消毒,要求温度为130℃-150℃,并保持20-30分钟,待温度降至60℃以下时,才可开箱取出使用。也可采用高压蒸汽消毒,维持20分钟。橡胶制品一般采用75%酒精棉球擦拭消毒,最好再用95%酒精棉球擦拭1次,以加速挥发去残留在橡胶上面的水分和酒精气味,然后用生盐水冲洗。金属器械可用新洁尔灭等消毒溶液浸泡,然后用生盐水等冲洗于净。也可用75%酒精棉球擦拭,或用酒精灯火焰消毒。溶液如润滑剂和生理盐水等,可隔水煮沸20-30分钟;或用高压蒸汽消毒,消毒时为避免玻璃瓶爆裂,瓶盖要取去或插上大号注射针头,瓶口用纱布包扎。其他用品如药棉、纱布、棉塞、毛巾、软木塞等,可采用隔水消毒或高压蒸汽消。
2.采精器的准备 采精器是模仿母兔阴道内环境条件而设计制成的一种人工阴道。采精器的基本构造是由外筒(又称外壳)、内胎、集精杯(瓶、管)、气嘴和固定胶圈等基本部件所组成。采精器外筒可用长4-5cm,内径为3.5-4cm的竹筒自行制造,内胎可取人用避孕套或胶皮指套改制。采精器安装前应先检查外筒,内胎是否有破裂缝、砂眼、老化发黏等不正常情况,否则将会发生漏水、漏气而影响采精。安装好的采精器,必须具备适宜的温度(38℃-40℃)、恰当的压力(内胎入口处自然闭合成“Y”形)和一定的润滑度等基本条件,才能满足公兔需要,顺利地采得精液。温度过低则不能刺公兔性欲,温度过高则会影响精子活力。压力不足,公兔不射精或射精不完全;反之压力过大,不仅妨碍公兔阴茎插入和射精,还可造成内胎破裂和精液外流。润滑度不够,公兔阴茎不易插入并有摩擦痛感;润滑剂过多,则往往混入精液影响质量。
3.采精场所的准备 采精要有良好的和固定的场所与环境,以便公兔建立起巩固的条件反射,同时防止精液污染。为此,采精场所应该宽广、平坦、安静、清洁和固定,采精前要将场所打扫干净,并配备有喷洒消毒和紫外线照射灭菌设备。
(三)公兔训练和采精
1.公兔训练 采精用的台兔有真、假之分,且各有利弊,所谓真台兔(即活兔)是指使用与公兔同种的母畜。一般说来,只要采精公兔已经习惯,则在性刺激效果上均无明显差别。活台兔应选择健康无病(包括性病、其他传染病、体外寄生虫病等)、体格健壮、大小适中、性情温驯的同种家兔。一般来说具备上述条件应用发情母兔最为理想。采精时台兔放在采精台上,由助手固定其头部即可。也可以训练公兔适应爬跨假台兔(兔皮填充物),必须经过一段时间的调教训练。调教方法很多,可根据具体情况选择采用。例如,在假台兔的后躯,涂抹发情母兔阴道黏液或尿液。调教期间,要特别注意改善和加强公兔的饲养管理,以保持健壮的种用体况。同时最好是在每天早上公兔精力充和性欲旺盛时进行,尤其是在炎夏高温季节,不宜在气温特高的中午或下午进行。初次爬跨采精成功后,还要连续地经过多次重复训练,才能建立起巩固的条件反射。训练过程中,有些公兔胆怯或不适应,要耐心、多接近、勤诱导地不能强迫抽打、恐吓或有其他不良刺激,以防产生性抑制而给调教工作造成更大障碍,有些公兔性烈,须特别注意安全,提防抓伤饲养人员。
2采精 采精时要顺势、轻柔,动作迅速,要注意保护公兔生殖器官免遭损伤保持其清洁卫生,为保障公兔的精液质量,每周采精1-2次为宜。
(四)精液检测与评分
精液品质检测是为了精液品质的优需,评定的各项指标,既是确定新鲜精液进行释、保存的依据,还能反映公兔饲养管理水平和生殖器官的功能状态,因此常用作诊断公兔不育成确定种用价值的重要手段。同时,也是量精液在稀释,保存、冷和运输过程中的品质变化及处理效果的重要判断依据。
1.精液品质量检测 采得的精液要迅速置于30℃左右的恒温水溶浴中或保温瓶中,以防温度突然下降,对精子造成低温打击。按照规定要求,住意保持工作室(20℃-30℃)和显微镜周围(37℃-38℃)适当温度。如果同时进行多头公畜精液检查时,要对家兔精液来源做标记以防乱。
事先做好各项检查准备工作,在采得精液后立即进行品质检查。检查时要求动作迅速,尽可能缩短检查时间,以便及时对精液做稀释保存等处理,防止质量下降。
检查操作过程不应使精液品质受到损害,如蘸取精液的玻璃棒等用具,既要消毒灭菌,但又不能残留有消毒药品及其气味。
取样要注意代表性,应从采得的全部并经轻轻搅拌均匀的精液中取样,以力求评定结果客观准确。
精液品质检查项目很多,通常采用逐次常规重点检查和定期全面检查相结合的办法。检查时不要仅限于精子本身,还要注意精液中有无杂质异物等情况。
评定精液质量等级,应对各项检查结果进行全面综合分析,一般不能有一两项指标就得出结论。有些项目必要时要重复2-3次,取其平均值作为结果。对1只种公兔精液品质和种用价值的评价,更不能只根据少数几次检查结果,而应以某个阶段多次评定记录作为综合分析结论的依据。
2、评定精液质量 大致可以归纳为2个方面:一是外观性状;二是显微镜检查精子生活力。
(1)外现性状 对精液的数量、颜色、气味、性状等进行检查。家兔每次射精量为0.5-2.5ml,家兔的精液为淡乳白色或浅灰白色,气味为略带腥味。外观检查主要防止使用受到污染的精液,如尿液、炎性产物、杂质等。
(2)精子活力 采集后的精液立即送到实验室放在36℃的水浴锅内,采集后的精液立即进行镜检,镜检的环境一定是清洁、温度较为恒定的,温度保持在20℃上,用胶头滴管取一滴精液滴在载片上,然后盖上盖玻片,放在显微镜下检查。如果精液内有精清,用胶头滴管把精清取出。根据精液的质量可分为5个等级,只有3分以上的精液才可以利用,低于3分的要丢弃,重新采集。在显微镜下观察,采用5分制,在显微镜视野中估测直线前进运动精子所占全部精子的百分数。直线前进动的精子为100%者,评定为5级,80%者,评定为3分;60%者,评定为3分,而低于3分的精液不能使用。
(五)精液的稀释
稀释液的温度和精液的温度必须一致,在稀释前把稀释液放入37℃的水浴锅内,用干净的胶头滴管沿着集精杯的内壁加入稀释液,让稀释液缓缓流入到集精杯底部。根据精液的质量和活力,稀释3-10倍,然后把稀释后的精液倒入集精瓶内。
把集精瓶放入17℃的恒温箱内(一般是车载冰箱)贮存和运输。
(六)输精
母兔人工授精前2小时饲喂饲料,让其保持相对安静。输精时操作人员洗手,皮肤消毒液消毒,戴上无尘手套、口罩、头套。
取出集精瓶,把精液倒入输精枪内的瓶中,一名人员抓住母兔正放在输精车上,输精人员一只手抓住尾巴提起,提到后腿离开支撑处。另一只手把输精枪插入母兔的阴道深部(一般输入7cm左右),然后注人精液,输精时,确保输精枪内没有气泡。注意输精时动作一定要轻,不能使劲强硬插入,防止破坏种母兔的阴道和子宫。
输精时要注意温度的差异,如果采精后立即输精,输精器内温度与精液温度保持在30℃左右;若4小时后输精,则应将精液温度逐渐降至17℃,以免造成对精子的损伤。
(七)促同期发情、排卵
为了提高配种受胎率,在工厂化养兔场母兔群经在输精前后注射激素,促进母兔同时发情、同期排卵。
如果是经产母兔,需在输精前50小时肌内注射30-50孕马血清;如果是初配种兔,则不需要注射孕马血清,在输精前29-32小时内,禁止给仔兔哺乳.
输精后,每只母兔立即注射0.8μg促排3号激素,该激素可以刺激母兔排卵。